PCR метод

Методът на PCR (полимеразна верижна реакция) е “златният стандарт” на съвременната ДНК диагностика, високо чувствителен метод на молекулярната биология. Методът на PCR се използва в медицината, генетиката, криминологията и други области. Той често и успешно се използва при диагностицирането на много инфекциозни заболявания.

Диагностика на инфекциозни заболявания чрез PCR

Тестът за PCR позволява откриването не само на самия патоген, но и на един фрагмент от чужди ДНК в изследваните материали. Изследваният (биологичен) материал е: венозна кръв, епителни клетки и тайната на гениталния тракт, спермата, слюнката, храчките и други биологични екскременти. Необходимият биологичен материал се определя от предполагаемата болест.

PCR методът в нашето време, разбира се, е мощен диагностичен инструмент. Може би единственият недостатък на проучването е неговата висока цена.

В списъка на заболяванията, чието наличие може да се определи чрез метода на PCR:

• вирусна и бактериална пневмония;
• туберкулоза;
• морбили, рубеола, паротит;
• инфекциозен хепатит от всякакви форми;
• салмонелоза, дифтерия;
• Хеликобактериоза и заболявания, причинени от чревни инфекции;
• ППБ (полово предавани болести): гонорея, хламидия, уреаплазмоза, сифилис, СПИН, генитален херпес, градинарлез и други.

STI скрининг, използвайки метода на PCR

За разлика от традиционните анализи, PCR технологията позволява откриването на полово предавани инфекции (ППИ), дори ако техните симптоми напълно липсват. За събиране на биологичен материал, жените са измити епителни клетки на цервикалния канал, мъжете – изстъргване на уретрата. Ако е необходимо, PCR методът извършва изследване на венозна кръв.

По този начин, тестът за STI, използващ метода на PCR, дава възможност да се идентифицират:

• вирус на човешка имунна недостатъчност (HIV);
• блед Трепонеми (причиняващ сифилис);
• Херпес симплекс вирус и цитомегаловирус;
• човешки папиломен вирус (HPV);
• хламидия, токсоплазма, микоплазми, уреаплазма и други сексуални инфекции.

Ако PCR анализът се извърши правилно, вероятността от фалшиви положителни резултати се изключва.
Отделно, трябва да се спомене човешкият папиломавирус (HPV) и значението на PCR метода за неговото диагностициране. За разлика от онкоцитологичното намазка, PCR методът може да определи специфичен тип HPV, по-специално неговите онкогенни типове 16 и 18, чието наличие заплашва жена с такова сериозно и често фатално заболяване като рак на шийката на матката. Навременното откриване на онкогенни видове HPV чрез метода на PCR често дава възможност да се предотврати развитието на рак на шийката на матката.

Имуноензимен анализ (ELISA) и метод на полимеразна верижна реакция (PCR): плюсове и минуси

Кой диагностичен метод е по-добър: PCR или ELISA? Правилният отговор на този въпрос не съществува, тъй като по същество диагнозата с помощта на тези две изследвания има различни цели. И по-често методите IFA и PTSR се прилагат в комплекс.

PCR тестът е необходим за определяне на специфичния причинител на инфекцията, той може да бъде открит веднага след заразяването, въпреки липсата на симптоматична проява на заболяването. Този метод е идеален за откриване на скрити и хронични бактериални и вирусни инфекции. С негова помощ няколко патогени могат да бъдат открити едновременно и по време на терапията PCR методът позволява да се оцени качеството му чрез определяне броя на копията на чужди ДНК.

За разлика от метода на PCR, методът ELISA е предназначен да открива не причинителя на инфекцията, а имунния отговор на организма към него, т.е. да открива наличието и количеството антитела към определен патоген. В зависимост от вида на откритите антитела (IgM, IgA, IgG) може да се определи степента на развитие на инфекциозния процес.

И двата метода и PCR и ELISA имат висока надеждност (съответно 100 и 90%). Но е важно да се отбележи фактът, че анализът на ELISA в някои случаи дава фалшиво положителни резултати (ако някое лице е болно от определена болест в миналото) или фалшиво-отрицателно (ако инфекцията беше прекарана сравнително наскоро).