PCR diagnostika infekcí
PCR, nebo jinak polymerázová řetězová reakce, je metoda pro laboratorní diagnostiku různých infekčních onemocnění.
Tato metoda byla vyvinuta Cary Muillis v roce 1983. Zpočátku byla PCR použita pouze pro vědecké účely, ale po chvíli byla zavedena do oblasti praktické medicíny.
Podstatou této metody je identifikovat příčinu infekce v DNA a fragmenty RNA. Pro každý patogen existuje referenční fragment DNA, který spouští tvorbu velkého počtu jeho kopií. Porovnává se s existující databází obsahující informace o struktuře DNA různých typů mikroorganismů.
S pomocí polymerázové řetězové reakce je možné nejen infekci, ale i kvantitativní vyhodnocení.
Kdy se používá PCR?
Analýza biologického materiálu, prováděná pomocí PCR, pomáhá detekovat různé urogenitální infekce, včetně skrytých, které se neobjevují jako zvláštní příznaky.
Tato metoda výzkumu nám umožňuje identifikovat následující infekce u lidí:
- herpes simplex virus obou typů;
- HIV infekce;
- gardnerellez;
- chlamydia;
- ureaplasmóza;
- Kandidóza;
- mykoplazmóza;
- trichomoniáza;
- infekce papilomaviru;
- stejně jako hepatitida B a C, tuberkulóza, heliobakterióza, infekční mononukleóza.
Při přípravě těhotenství a během těhotenství musí být ženě přiřazena PCR diagnostika různých sexuálních infekcí.
Biologický materiál pro výzkum PCR
K detekci infekcí pomocí PCR lze použít následující:
- moč, tampon od cervikálního kanálu (u žen), tampón z močové trubice, sekrety z genitálií – pro testování sexuálních infekcí;
- krev – pro výzkum infekce HIV a hepatitidy C;
- Roztok z krku – pro vyšetření infekční mononukleózy.
Výhody a nevýhody PCR diagnostiky infekcí
Výhoda analýzy infekce prováděné metodou PCR zahrnuje:
- Univerzalita – když jiné diagnostické metody jsou bezmocné, PCR detekuje jakoukoliv RNA a DNA.
- Specificita. Ve studijním materiálu tato metoda odhaluje sekvenci nukleotidů typických pro konkrétní patogen infekce. Polymerázová řetězová reakce umožňuje identifikovat několik různých patogenů ve stejném materiálu.
- Citlivost. Je zjištěna infekce při použití této metody, i když její obsah je velmi nízký.
- Účinnost. Identifikace příčiny infekce trvá poměrně málo času – jen několik hodin.
- Kromě toho polymerázová řetězová reakce pomáhá detekovat reakci lidského těla na penetraci patogenních mikroorganismů, ale specifického patogenu. Z tohoto důvodu je možné zjistit chorobu pacienta dříve, než se začne projevovat se specifickými příznaky.
“Mínusy” této diagnostické metody zahrnují potřebu přísného dodržování požadavků na vybavení laboratorních místností s vysoce čistými filtry, takže kontaminace jiných živých organismů odebraných k analýze biologického materiálu nedochází.
Někdy může analýza provedená PCR poskytnout negativní výsledek za přítomnosti zjevných příznaků určité choroby. To může znamenat nesoulad s pravidly pro shromažďování biologického materiálu.
Současně pozitivní výsledek analýzy není vždy známkou toho, že pacient má určitou nemoc. Takže například po ukončení léčby zesnulý agent po určitou dobu dává pozitivní PCR-analýzu.