طريقة PCR
طريقة PCR (تفاعل البلمرة المتسلسل) هي “المعيار الذهبي” لتشخيص الحمض النووي الحديث ، وهي طريقة شديدة الحساسية للبيولوجيا الجزيئية. يتم استخدام طريقة PCR في الطب وعلم الوراثة وعلم الجريمة وغيرها من المجالات. وغالبا ما تستخدم بنجاح في تشخيص العديد من الأمراض المعدية.
تشخيص الأمراض المعدية بواسطة PCR
يسمح اختبار PCR باكتشاف العامل الممرض نفسه فقط ، ولكن حتى جزء واحد من الحمض النووي الأجنبي في المادة قيد البحث. المادة (البيولوجية) التي تم التحقيق فيها هي: الدم الوريدي ، والخلايا الظهارية ، وسر الجهاز التناسلي ، والحيوانات المنوية ، واللعاب ، والبلغم ، وغيرها من المخلفات البيولوجية. يتم تحديد المواد البيولوجية المطلوبة من خلال المرض المزعوم.
طريقة PCR في عصرنا ، بالطبع ، هي أداة تشخيصية قوية. ربما العيب الوحيد للدراسة هو سعره المرتفع.
في قائمة الأمراض ، يمكن تحديد وجودها بواسطة طريقة PCR:
- الالتهاب الرئوي الفيروسي والبكتري.
- السل؛
- الحصبة ، الحصبة الألمانية ، التهاب الغدة النكفية ؛
- التهاب الكبد المعدية بجميع أشكاله ؛
- داء السلمونيلات ، الخناق.
- Helicobacteriosis والأمراض التي تسببها الالتهابات المعوية.
- الأمراض المنقولة بالاتصال الجنسي (الأمراض المنقولة جنسيا): السيلان ، الكلاميديا ، ureaplasmosis ، الزهري ، الإيدز ، الهربس التناسلي ، gardnerellez وغيرها.
فحص STI باستخدام طريقة PCR
بخلاف التحاليل التقليدية ، تسمح تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) باكتشاف العدوى المنقولة جنسياً (STIs) حتى لو كانت أعراضها غائبة تماماً. لجمع المواد البيولوجية ، يتم تنظيف النساء الخلايا الظهارية من قناة عنق الرحم ، والرجال – تجريف الإحليل. عند الضرورة ، تقوم طريقة PCR بإجراء دراسة للدم الوريدي.
وبالتالي ، فإن اختبار STI باستخدام طريقة PCR يجعل من الممكن تحديد:
- فيروس نقص المناعة البشرية (HIV) ؛
- شاحب treponemus (العامل المسبب لمرض الزهري) ؛
- فيروس الهربس البسيط والفيروس المضخم للخلايا.
- فيروس الورم الحليمي البشري (فيروس الورم الحليمي البشري) ؛
- الكلاميديا ، و toxoplasm ، و mycoplasmas ، و ureaplasma ، والالتهابات الجنسية الأخرى.
إذا تم إجراء تحليل PCR بشكل صحيح ، يتم استبعاد احتمال النتائج الإيجابية الكاذبة.
بشكل منفصل ، يجب ذكر فيروس الورم الحليمي البشري (HPV) وأهمية طريقة PCR لتشخيصه. وعلى النقيض من اللطاخة الخلوية ، يمكن لطريقة PCR أن تحدد نوعًا معينًا من فيروس الورم الحليمي البشري ، ولا سيما النوعين الأنثويين 16 و 18 ، الذي يهدد وجوده امرأة بهذا المرض الخطير والمميت في كثير من الأحيان مثل سرطان عنق الرحم. إن الكشف في الوقت المناسب عن أنواع فيروس الورم الحليمي البشري المأخوذة عن طريق الورم عن طريق طريقة PCR غالباً ما يوفر فرصة لمنع تطور سرطان عنق الرحم.
تحليل Immunoenzyme (ELISA) وطريقة تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR): الإيجابيات والسلبيات
ما هي الطريقة التشخيصية الأفضل: PCR أو ELISA؟ الإجابة الصحيحة لهذا السؤال غير موجودة ، لأن التشخيص بمساعدة هاتين الدراستين له غايات مختلفة. وفي كثير من الأحيان يتم تطبيق أساليب IFA و PTSR في مجمع.
اختبار PCR ضروري لتحديد العامل المسبب المحدد للعدوى ، يمكن اكتشافه مباشرة بعد الإصابة ، على الرغم من عدم وجود مظهر من أعراض المرض. هذه الطريقة مثالية للكشف عن الالتهابات البكتيرية والفيروسية المخفية والمزمنة.
وبمساعدتها ، يمكن الكشف عن العديد من مسببات الأمراض في وقت واحد ، وأثناء العلاج ، تسمح طريقة PCR بتقييم جودتها بتحديد عدد نسخ الحمض النووي الأجنبي.
بخلاف تقنية PCR ، تم تصميم طريقة ELISA لا للكشف عن العامل المسبب للعدوى ، ولكن الاستجابة المناعية للكائن الحي لها ، أي للكشف عن وجود ومقدار الأجسام المضادة لعامل ممرض معين. اعتمادا على نوع الأجسام المضادة المكتشفة (IgM ، IgA ، IgG) ، يمكن تحديد مرحلة تطور العملية المعدية.
كلتا الطريقتين و PCR و ELISA تتمتعان بمصداقية عالية (100 و 90٪ على التوالي). ولكن من المهم أن نلاحظ حقيقة أن تحليل ELISA في بعض الحالات يعطي نتائج إيجابية كاذبة (إذا كان الشخص مريضاً بمرض معين في الماضي) أو نتيجة سلبية كاذبة (إذا تم إمرار العدوى مؤخراً نسبياً).